ELISA 实验能够很好的对蛋白进行精确定量且操作简单,然而需要同时检测多个样本的多个因子时,ELISA 需要多次重复相同的步骤,不能很快的得到实验结果。Lumimex 液相芯片,以 ELISA 三明治夹心原理,利用微球和基于流式细胞仪原理的 Lumimex 仪器相结合的技术,采用 ELISA 板的形式实现多样本验证,在单孔中同时检测多个蛋白指标,进行精确定量。
Luminex 液相抗体芯片技术采用不同颜色编码的微球,包被相应的特异性抗体,在一个孔可同时检测多达 100 种分析物,利用 96 孔板作为反应板,实现高通量的蛋白精确定量。R&D Systems 公司有 15 年 Luminex 试剂盒的研发历史,具有丰富的免疫检测经验,采用与 ELISA 试剂盒质量一致的抗体对和缓冲液体系优化,在「金标准 ELISA」的基础上,提供最高标准和最优性能的 Luminex 多重检测试剂,对多个生物标志物进行定量和筛选。
特点
灵活:根据客户需求,可同时检测多达 100 种指标物
性价比高:相比于单因子检测,成本更低
选择性多:可检测的指标种类数不断增加,部分因子是 R&D Systems 公司独有
实验操作简单:整个实验流程在 3~3.5 小时内完成
同时检测多个指标所需的样本量极少(<50 μL)
实验原理
应用
(1)不同乳腺癌细胞系分泌细胞因子谱分析
乳腺癌细胞系分泌因子表达谱。MCF-7, MDA-MB-231, SK-BR-3, T47D 和 ZR-75-1 乳腺癌细胞系培养后收集细胞上清,利用 99 因子的 Luminex Assay 进行检测。其中,68 个因子浓度较低检测不到。表中 31 因子数值单位为 pg/mL。标准曲线按照 1:3 梯度稀释,范围从 1:1-1:243。
(2)检测充血性心力衰竭病人血清生物标志物
在充血性心力衰竭疾病患者体内,进一步优化生物标志物组合,检测其中 6 种指标。选取充血性心力衰竭病人 10 个,健康人 20 个,利用 Luminex High Performance Human Cardiac Panel A (货号 LUCA000) 检测 TNF RII/TNFRSF1B、ST2/IL-1 R4、CD40 Ligand、FailureProprotein Convertase 9/PCSK9、GDF-15 和 PAPP-A,其中 PAPP-A 在所有样本中浓度低于最低检测限。
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