意得辑国际科研发表学院

简介

脂联素（Adiponectin）是一种来自脂肪细胞的蛋白，具有多种生物学功能。它以低分子量（LMW）三聚体、中分子量（MMW）六聚体和高分子量（HMW）多聚体的形式在血浆中循环流动。脂联素（Adiponectin）的这些寡聚形态对特定靶组织发挥着不同的作用。HMW 脂联素是一种主要的生物活性形态，具有胰岛素增敏活性。它的循环水平与肥胖、胰岛素抗性和冠心病 (CAD) 呈负相关。目前，ELISA 测定 HMW 脂联素需要对其进行选择性酶解成 LMW 和 MMW 脂联素，这是一个相当费劲的过程。R&D Systems 开发了使用 HMW 脂联素特异性抗体的 ELISA 方法。这种分析非常简单易用，不需要任何样本预处理过程，而且重现性非常好。

通用方法

抗体制备

通过凝胶过滤层析从重组脂联素的不均匀混合物中纯化 HMW 脂联素，用它们生成 anti-HMW 脂联素单克隆抗体。这些抗体经过严格的测试，确保其对 HMW 脂联素的特异性。两个 HMW 脂联素特异性抗体进行配对以作为标准的定量夹心法酶免分析中的捕获抗体和检测抗体。

分析流程

用 Quantikine^® Human Total Adiponectin/Acrp30 和 Quantikine Human HMW Adiponectin /Acrp30 ELISA Kits 测定脂联素异构体

图 1. 用分子排阻层析法从重组脂联素的不均匀混合物中纯化 HMW、MMW 和 LMW 脂联素异构体。分别将 HMW (绿线)、MMW* (粉红线) 和 LMW (红线) 部分、以及混合分子量脂联素 (蓝线) 上样 TSK 凝胶层析柱。分别收集各组分，并用 Quantikine Human Total Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit (Catalog # DRP300; 左图) 和 Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit (Catalog # DHWAD0; 右图) 进行分析。Human Total Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 检测全部三种分子量的脂联素异构体，而 Human HMW Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 只检测 HMW 脂联素。
* MMW 脂联素部分包含少量 HMW 脂联素。

用 Quantikine Human Total Adiponectin/Acrp30 和 Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kits 检测人血清中脂联素异构体

图 2. 用 TSK 凝胶层析柱处理低 (蓝线)、高 (粉红线) 和超高 (绿线)BMI 含量的不同人类个体的血清。用 Quantikine Human Total Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit (左图) 和 Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit (右图) 对收集的组分进行分析。Human Total Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 检测所有三种分子量的脂联素异构体，而 Human HMW Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 只检测 HMW 脂联素。此外，使用 Human HMW Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 进行检查时发现不同 BMI 含量的血清样本中的 HMW 脂联素水平差异非常明显（低 BMI 平均值=19.8，n=4；高 BMI 平均值=32.8，n=4；超高 BMI 平均值=55.4，n=3）。

低 BMI 与高 BMI、超高 BMI 的血清脂联素比值 

   
图 3. 用 Quantikine Human Total Adiponectin/Acrp30 和 Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kits 在低 BMI、高 BMI 和超高 BMI 个体的血清中测定脂联素水平。用这两种 ELISA 试剂盒的测定值计算了低 BMI 与高 BMI 个体的脂联素倍数差异（蓝色柱）、低 BMI 和超高 BMI 个体的脂联素倍数差异（绿色柱）。Human HMW Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 检测数据表明，低 BMI 与高 BMI 个体的脂联素水平相差 2.4 倍，低 BMI 与超高 BMI 个体的脂联素水平相差 5.1 倍。然而 Human Total Adiponectin/Acrp30 Immunoassay 检测数据表明，低 BMI 与高 BMI 个体的脂联素水平相差 1.9 倍，低 BMI 与超高 BMI 个体的脂联素水平相差 2.9 倍。（低 BMI 平均=19.8，n=4；高 BMI 平均=32.8，n=4；超高 BMI 平均=55.4，n=3）

讨论

● Quantikine Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit (目录号 DHWAD0) 是一套完     整的、经过充分验证的即用型夹心法 ELISA，为 HMW 脂联素定量提供最高水平的特异性、准确性、精确度和灵敏度。
● Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit 是首个无需对样本进行蛋白降解预处理的商业化 HMW 脂联素 ELISA 试剂盒。
● 在低 BMI 和超高 BMI 个体检测脂联素表达水平，其中 HMW 脂联素揭示了更大的倍数差异。这说明对于代谢综合征相关状况（比如肥胖和胰岛素抵抗）来说，HMW 脂联素水平可以成为比总脂联素水平更有用的监控指标。
● Human HMW Adiponectin/Acrp30 ELISA Kit 提供了一个简单、直观的测定血清和血浆中 HMW 脂联素水平的方法，可用于肥胖症、二型糖尿病和冠心病研究。